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   『您所不知道的RNAscope』 【2018/8/3】
📢📢📢『您所不知道的RNAscope』📢📢📢

RNAscope技術是由美國Bio-techne旗下Advanced Cell Diagnostics (ACD)公司研發的RNA原位雜交產品,在近年來的生物檢測領域發展迅速

小編這次要介紹的是應用RNAscope技術<A1Rs與成年小鼠聽覺重塑能力的相關性>的研究。

人們一直相信聽覺皮層的神經回路形成與出生後早期的聲音影響緊密相關。聽覺皮層選擇性延伸神經突觸以增強聽覺刺激,是人類語言獲得過程中的一個重要步驟。而成年人缺乏這種塑型性。Jay A. Blundon等人發現小鼠的聽覺皮層的早期塑形能力在成年鼠中也可以發生,這需要在進行聲音刺激的同時在聽覺丘腦阻斷產生ecto-5′-nucleotidase–dependent adenosine或者A1–adenosine receptor(A1Rs)信號通路。這一重塑過程發生成年小鼠的皮層圖與聽覺皮層的個體神經元上並與音調辨別能力的長期改善相關。
在這項研究中,Jay等人通過注射lentivirusese構建的siRNA干擾Adora1基因(即編碼A1Rs)的表達,以觀察在阻斷了A1Rs後,聽覺重塑的能力。由於這項操作在基因水準完成的,通過對Adora1mRNA的檢測可以有效判斷實驗是否達到了阻斷A1Rs的目的。下圖為在聽覺丘腦內原位檢測轉染小鼠(Gbx2CreER; Adora1fl/fl)與野生小鼠(WT)Adora1的mRNA水準。結果表明轉染小鼠腦內的Adora1受到了明顯抑制。
 
📎文章連結:http://science.sciencemag.org/content/356/6345/1352/tab-pdf
 
RNAscope®檢測技術是一種新型的RNA原位雜交(ISH)方法,使單個RNA分子於組織或細胞上顯現為一個單一的點,實現單點目標RNA的視覺化,並能提供定性、定量的結果數據。
1⃣特色:利用雙Z探針設計以及特殊信號放大方法保證了檢測的高敏感度和特異性。
2⃣檢體應用:
可用於檢測新鮮冷凍(Fresh frozen)、新鮮固定(Fix frozen)或福馬林固定石蠟包埋組織中(FFPET)的mRNA和長鏈非編碼RNA。
3⃣呈色試劑:可見光、螢光方式
4⃣偵測標的:mRNA和長鏈非編碼RNA(LncRNA)





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